【摘要】：目的抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,ACA)存在beta 2-糖蛋白Ⅰ(β2-GPⅠ)依赖型与β2-GPⅠ非依赖型两种性质类型。前者主要存在于抗磷脂抗体综合征(antiphospholipid antibody syndrome,APS)等自身免疫性疾病患者中梅毒患者,且可导致患者出现动/静脉血栓形成和血小板减少等凝血功能异常表现;而β2-GPⅠ非依赖型ACA则主要存在于感染性疾病患者中,且与上述临床表现无关。另外研究发现某些感染性疾病患者可能存在凝血功能障碍,而梅毒患者的凝血功能未见报道。而近来报道感染性疾病可能也存在β2-GPⅠ依赖型ACA。梅毒患者与梅毒生物学假阳性(biological false-positive,BFP)人群血清中均存在梅毒非特异性抗体阳性,ACA作为梅毒非特异性抗体的主要组分,但其β2-GPⅠ依赖性质和凝血功能仍有待进一步明确。本研究重点明确梅毒患者与BFP人群中ACA的异质性,同时探讨其与凝血功能的相关性。方法共纳入675例患者(包括梅毒患者465例,BFP人群146例,APS患者64例)以及选取新西兰雄兔8只。使用化学发光试验方法检测实验人群的血清β2-GPⅠ依赖型ACA IgA/IgG/IgM和抗β2-GPI IgA/IgG/IgM抗体以及活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、纤维蛋白原浓度(fibrinogen concentration,FIB)和血小板计数等相关常规凝血功能指标;使用自行构建ELISA方法检测实验兔血清β2-GPI依赖型ACA,同时使用性病研究实验室试验(venereal disease research laboratory,VDRL)检测实验兔血清梅毒非特异性抗体情况。
结果BFP人群与APS患者血清β2-GPⅠ依赖型ACA和抗β2-GPⅠ抗体的阳性率均高于梅毒患者,差异有统计学意义(BFP:22.60%和28.77%,APS:32.81%和32.81%,梅毒:3.87%和1.08%;P0.001);而BFP人群与APS患者血清自免抗体阳性率无统计学差异(P=0.119;P=0.556)。梅毒患者与BFP人群血清β2-GPⅠ依赖型ACA浓度水平和阳性率均与快速血浆反应素试验(rapid plasma regain,RPR)滴度均无统计学相关性(P0.05)。梅毒患者血清β2-GPI依赖型ACA和抗β2-GPⅠ抗体的主要亚型均为IgM;而BFP人群和APS患者则以IgG亚型为主,且其IgA亚型抗体也有较高的检出率。本研究还发现与梅毒患者相比,BFP人群和APS患者的APTT(P0.001)、PT(P0.001)延长,FIB降低(P=0.022),血小板计数减少(P0.001)。与自身免疫性抗体阴性的各组人群相比,自身免疫性抗体阳性的梅毒患者、BFP人群与APS患者的APTT均有延长(P0.05)。另外,对实验兔免疫偶联牛血清白蛋白的心磷脂抗原后可诱导其产生β2-GPⅠ依赖型ACA,并可导致部分实验兔的VDRL检测结果呈阳性。
结论梅毒患者和BFP人群的ACA存在异质性,梅毒患者的ACA为β2-GPⅠ非依赖型梅毒患者,而BFP人群存在明显比例的阳性β2-GPⅠ依赖型ACA,且其阳性率接近于阳性对照的APS患者,同时推测β2-GPⅠ依赖型ACA可能是导致梅毒生物学假阳性现象的原因之一。另外,β2-GPⅠ依赖型ACA与梅毒非特异性抗体检测的一致性差,β2-GPⅠ依赖型ACA浓度和阳性率与梅毒非特异性抗体滴度均无统计学相关性,提示β2-GPⅠ依赖型ACA与梅毒非特异性抗体检测方法所测的ACA是不同的。凝血功能分析发现与梅毒患者相比,BFP人群更易出现凝血功能障碍倾向,且自身免疫性抗体可能通过内源性途径影响机体的凝血功能。
